植物组培十大特点

第一篇:植物组培十大特点

       植物组培十大特点

       1、快速繁殖某些稀有植物或有较大经济价值的植物

       依靠自然条件在较短时间内繁殖稀有植物和经济价值较高的植物,受到地理环境和季节的限制,很难达到快速、高效的目的;特别对于在短时期内需要达到一定数量,才能创造应有价值的植物,时间就是效益,只有通过组织培养的方法才能满足这一要求。

       用组织培养法繁殖植物,这是组织培养应用于生产的主要的和成效最大的实例。首先是在兰花上的成功应用。自Morel在1960年得到兰花组织培养苗后,很快应用于生产,形成了组织培养法繁殖兰花工业。

       由于组织培养法繁殖植物的明显特点是快速,每年可以数以百完倍速度繁殖,因此对一些繁殖系数低,不能用种子繁殖的名特优植物品种的繁殖,尤为意义重大。

       2、脱毒

       植物中有很多都带有病毒,严重影响植物的产量和品质,给农业带来灾害。特别是无性繁殖植物,如马铃薯、草莓、大蒜、康乃馨等,由于病毒是通过维管束传导的,因此利用这些植物营养器官繁殖,就会把病毒带到新的植物个体上而发生病害。但是也证明感病植株并不是每个部位都带有病毒,如茎尖生长点尚未分化成维管束的部分,可能不带病毒。若利用组织培养法进行茎尖培养,再生的植株有可能不带病毒,从而获得脱病毒的苗,再用这种苗进行繁殖,则种植的植物就不会或极少发生病毒病。

       所获得的脱毒苗一定要经过鉴定,确认不带病毒才能使用。使用组织培养法获得脱毒苗已经在草莓、葡萄、康乃馨等获得成功,产生明显的经济效应。

       3、植物种质资源的保存、挽救濒于灭绝的植物

       长期以来人们想了很多方法来保存植物,如储存果实,储存种子,储存块根、块茎、种球、鳞茎;用常温、低温、变温、低氧、充惰性气体等,这些方法在一定程度上收到了好的或比较好的效果,但仍存在许多问题。主要问题是付出的代价高,占的空间大,保存时间短,而且易受环境条件的限制。植物组织培养结合超低温保存技术,可以给植物种质保存带来一次大的飞跃。因为保存一个细胞就相当与保存一粒种子,但所占的空间仅为原来的几万分之一,而且在-193度的液氮中可以长时间保存,不像种子那样需要年年更新或经常更新。

       环境的不断变化使许多种类的植物面临着灭绝的危险,而且许多种植物已经灭绝,留给人类的只是一种遗憾。如何挽救这些植物,还有许许多多的动物,已成为世人关注的问题。实践证明,通过组织培养的方法可以使一部分濒危的植物种类得到延续和保存;如果在结合超低温保存技术,就可以使这些植物得到较为永久性的保存。其实,对大多数普通植物来说,用组织培养的方法保存其种质材料,也具有十分重要的意义。因为,人们现在无法预知哪些植物会面临灭顶之灾,或许今天看似繁茂的植物,明天就可能被沙漠、洪水、大火或战争吞没。

       4、通过花药和花粉培养获得单倍体植株、缩短育种年限

       通过花药和花粉组织培养可以获得单倍体植物,大大缩短了育种时间。使新品种的培育过程大大简化

       5、胚胎培养的应用

       在远源杂交中,杂交后形成的胚珠往往在未成熟状态时,就停止生长,不能形成有生活力的种子,因而杂交不孕,这给远缘杂交造成极大困难。十九世纪二十年代末,Laibach用胚培养技术培养亚麻种间杂种胚,第一个获得了杂种植物,这一成功为在远缘时克服杂交不亲和的障碍提供了一项有用的技术。

       这项技术发展至今,已经相当成熟,可以说多数植物的成熟或未成熟胚通过培养都可获得成功。幼胚培养已经可使5个细胞大小的极幼龄的胚状结构培养成植株。但胚珠培养的研究不多,单个胚珠培养尚存在许多问题,需作深化研究。

       远缘杂交中,由于生理上和遗传上的障碍而不能杂交成功,可采用试管受精加以克服,即将母本胚珠离体培养,使异种花粉在胚珠上萌发受精,产生的杂种胚在试管中发育成完整植株。用胚乳培养可获得三倍体植株,为诱导形成三倍体植物开辟了一条新途径。三倍体加倍后得到六倍体,可育成多倍体品种。

       6、细胞融合通过原生质体融合,可部分克服有性杂交不亲和性,而获得体细胞杂种,从而创造新种货育成优良品种。

       7、培养细胞突变体的应用

       培养细胞处在不断分生状态,它就容易受培养条件和外加压力(如射线、化学物质)的影响而产生诱变,从中可以筛选出有用的突变体,从而育成新品种。目前用这种方法已经筛选到抗病、抗盐、高蛋白、高产等突变体,有些已经用于生产。

       8、用于遗传学、分子生物学、细胞生物学、组织学、胚胎学、基因工程、生物工程等

       要揭开生命活动的秘密,需要多科学、多技术的相互配合,其中植物组织培养技术是不可缺少的,它为遗传学、分子生物学、细胞生物学、生物工程等提供了一种有效、快速的方法。因为要揭示生命的奥秘,首先要研究单个基因的作用,研究它在细胞内是如何组装的,如何与其它基因发生联系,如何表达和调控等。分离单个基因,对它DNA进行测序,再对其中的某些碱基实行突变,然后还需要将基因送到受体细胞当中,看表达情况,以确定其功能。接受基因的受体细胞要产生再生植株,就需要通过组织培养的方法才能实现。

       9、利用组织培养的材料作为植物生物反应器

       中国的中草药是一份人类宝贵的财富,但很多种中草药资源匮乏,产量不足,甚至濒于灭绝。如果能利用组织和细胞培养的方法在实验室内生产,不再依附于自然环境,不仅可以解决现有困难,而且可以通过筛选高产有效成分的细胞系,来提高其药用价值。比如用培养的人参悬浮细胞,来生产人参皂苷,已在日本等国家形成规模。利用培养的植物细胞和组织细胞作为生物反应器,也可以生产某些蛋白质、氨基酸、抗生素、疫苗等,如用生食蔬菜生产乙肝疫苗正在实验中。

       10、用于其它未知科学的研究

       现代科学发展非常迅速,很多现在预想不到的事情都有可能发生,新发明、新发现、新创造层出不穷,今天认为不可能的东西明天就可能变成现实。植物组织培养也同样具有许多尚未发掘出的潜力,说不定有一天人们会在三角瓶内种出大南瓜。

       总之,现在的植物组织培养仍然处于发展阶段,远远没有达到它的高峰期,很多机理人们还没有搞清楚,它的潜力还远远没有发挥出来。相信在今后的几十年内,组织培养在我国将会有更大的发展,在农业、制药业、加工业等方面将会发挥更大的作用,创造出更大的经济效益。

第二篇:植物组培简答题

       1、从外植体到小植株有哪些培养途径?

       离体器官的分化有三种比较典型的分化途径:一是由分生组织直接分生芽;二是由分生组织形成愈伤组织,经过分化实现细胞的全能性;三是游离细胞或原生质体形成胚状体(embryoid),由胚状体直接重建完整植株,或制成人工种子后再重建植株。

       愈伤组织再分化时,可经过两条途径,一是由愈伤组织的部分细胞先分化产生芽(或根),再在另一种培养基上产生根(或芽),形成一个完整的植株,因为芽和根都是植物体的器官,所以这一过程叫器官发生途径。二是在愈伤组织中产生出一些与种子中的胚相似的结构,即同时形成一个有苗端和根端的两极性结构,然后再在另一种培养基上同时发展成带根苗,由于这一过程与种子中胚的形成和种子萌发时形成幼苗的过程相似,所以叫做胚状体发生或无性胚胎发生。

       2、试述目前植物组织培养的应用。

       (1)植物离体快繁(无性系快速繁殖)(2)无病毒苗木培育

       (3)培育新品种或创制新物种(4)次生代谢物生产

       (5)植物种质资源的离体保存(6)人工种子

       3、简述植物组织培养无菌操作技术的一般过程。

       (1)无菌操作室消毒(无菌操作室除定期熏蒸灭菌外,还要经常通过紫外灯灭菌。)(2)无菌操作步骤

       A.在实验之前30min将超净工作台的紫外灯打开,进行灭菌。工作人员要避免紫外线照射。做实验时将紫外灯关闭。

       B.用酒精喷壶或酒精棉将超净工作台消毒(酒精浓度为70%)。C.实验操作前,工作人员的手和小臂用70%酒精消毒。

       D.使用的镊子、解剖刀等用90%酒精浸泡,之后放在酒精灯上火烧灭菌,再放在灭菌支架上冷却后使用。

       E.在植入或移植材料的前后,培养瓶的瓶口须在酒精灯火焰上烧烤灭菌。

       4、常用培养基分为哪几类?各类的主要特点是什么?

       1.MS培养基是1962年Murashige和Skoog为培养烟草材料而设计的。特点是无机盐的浓度高,有加速愈伤组织生长的作用,能满足植物组织对矿质营养的要求。铵盐和硝酸盐含量高,比例也比较适合,也不需要添加更多的有机附加物,这是目前应用最广泛的一种培养基。但它不适合生长缓慢、对无机盐浓度要求较低的植物,尤其不适合过高易发生毒害的植物。与MS培养基较为接近的还有LS培养基(Linsmaier和Skoog,1965)及ER培养基(Eriksson,1965)。2.与MS培养基相比,于1943年设计,1963年作了改良的White培养基则是一个无机盐浓度较低的培养基。它的使用也很广泛,同时它还非常适合于生根培养和胚胎培养。3.B5培养基是1968年由Gamborg等设计的。它的主要特点是含有较低的铵盐,该营养成分可能对不少培养物的生长有抑制作用,对有些植物如双子叶植物(如豆科植物)特别是木本植物,却更适合生长。4.N6培养基是1974年由我国的朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计的,其KN03和(NH4)2S04含量高且不含钼。目前在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花粉和花药培养和组织培养。

       5、试述培养基选择的方法。

       培养基的选择是植物组织培养中较为关键的环节。选择合适的培养基是植物组织培养成功的基础。选择合适的培养基主要从以下两个方面考虑:一是基本培养基;二是各种激素的浓度及相对比例。

       可根据实验目的和实验材料确定一种合适的基本培养基。

       组织培养中对培养物影响最大的是外源激素,在基本培养基确定之后,实验中要大量进行的工作是用不同种类的激素进行浓度和各种激素间相互比例的配合试验。可用“广谱实验法”确定各种激素的有无及浓度。

       6、简述植物细胞全能性、细胞分化、脱分化与再分化的概念。

       植物细胞全能性(totipotency)是植物组织培养的理论基础。它是指一个生活的植物细胞,只要有完整的膜系统和细胞核,它就会有一整套发育成一个完整植株的全部遗传信息,在适当的条件下,这些信息可以表达,再生成一个完整植株。

       细胞分化(differentiation)是指生物在个体发育过程中细胞由一般变为特殊的现象,即普通形态结构的细胞,向着不同形态结构的方向发展,从而在机能上也各不相同。

       脱分化:由失去分裂能力的细胞回复到分生性状态并进行分裂,形成形成一种高度液泡化的呈无定形态的薄壁细胞即愈伤组织的现象(或过程)称为“脱分化”(dedifferentiation)。

       再分化:由无分化的愈伤组织的细胞再转变成为具有一定结构,执行一定生理功能的细胞团和组织,进而构成一个完整的植物体或植物器官的现象(或过程),叫做“再分化”(redifferentiation)。

       2、再分化有哪几种方式?它们的特点是什么?

       (1)细胞水平的再分化(2)组织水平的再分化(3)器官水平的再分化(4)植株再生

       根和茎(包括其变态器官)或芽器官的发生可使植株重建。在离体培养中通过根、芽发生而形成再生植株的方式大致有三种:①芽产生后,芽的基部长根形成小植株;②先形成根,根上再出芽;③愈伤组织的不同部位分别形成芽和根,然后形成维管组织把两者结合起来形成一个植株。

       再分化有两种途径,一种是器官发生(organogenesis)途径,一种是胚胎发生(embryogenesis)途径。前者具体包括:①先形成芽,后在芽基部长根;②先形成根,再从根基部形成芽;③在愈伤组织不同部位分别形成芽和根,然后根、芽的维管束接通形成完整植株;④仅形成芽或根(如茶树的花粉愈伤组织诱导器官分化时,往往只形成根,而芽的发生则十分困难)。在大多数情况下,再分化过程是在愈伤组织细胞中发生的,但在有些情况下,再分化可以直接发生于脱分化的细胞中,无须经历愈伤组织阶段。

       7、愈伤组织形成的条件是什么?其形成过程分为哪几个阶段?

       形成条件: 在一个完整的植物中,每个分化细胞都是某个器官和组织中的一个成员,它只能在与其周围成员相互协调和彼此制约当中,恰如其分地发挥整个植株所赋予它的一定的功能,而不具备施展其全能性的外部条件。然而,这些细胞若是一旦脱离了母体植株,摆脱了原来所受到的遗传上的控制和生理上的制约,在一定的培养条件下,就会发生一种回复变化,从而失去分化状态,变为分生细胞,实现脱分化过程。然后,这些脱分化细胞经过连续的有丝分裂,形成愈伤组织。形成过程分为3个阶段1诱导期2分裂期3分化期(形成期)。

       8、试述优良愈伤组织应用具备的特点及获得优良愈伤组织的方法。优良愈伤组织应用具备的特点:

       (1)高度的胚性或再分化能力,以便从这些愈伤组织得到再生植株。

       (2)容易散碎,以便用这些愈伤组织建立优良的悬浮系,并且在需要时能从中分离出全能性原生质体。(3)旺盛的自我增殖能力,以便用这些愈伤组织建立大规模的愈伤组织无性系。(4)经过长期继代保存而不丧失胚性,以便有可能对它们进行各种遗传操作。优良愈伤组织获得的方法:

       (1)选择适当的基因型和适当的外植体。

       (2)选择正确的培养基,特别是正确的植物激素的种类和浓度,以及在需要配合使用生长素和细胞分裂素时,二者之间正确的配比。

       (3)采用某些特殊的理化因素改变愈伤组织诱导培养基和培养条件。

       9、植物体细胞胚胎发生的概念是什么?有哪些途径?(1)体细胞胚胎发生的概念

       正常情况下,植物胚胎发生(embryogenesis)是指受精后的一系列连续过程,即从合子(受精卵)到成熟胚的发生、发育的有规律变化,这种情况下形成的胚称为合子胚。在离体培养条件下,植物离体培养的细胞、组织、器官也可以产生类似胚的结构,其形成也经历一个类似胚胎的发生和发育过程,这种类似胚的结构称为胚状体。成熟的胚状体可以像合子胚一样长出根、芽,萌发再生植株。由单细胞或一群细胞被诱导不断再生非合子胚,并萌发形成完整植株的发育过程称为体细胞胚胎发生。植物体细胞胚胎发生具有普遍性。(2)体细胞胚胎发生的途径

       由外植体诱导体细胞胚胎发生的途径有两种,即直接途径和间接途径。

       直接途径是指从培养中的器官、组织、细胞或原生质体某些部位的胚性细胞直接诱导分化出体细胞胚胎,中间不经过愈伤组织阶段,这种“胚性细胞”是在胚胎发生之前就已“决定”了的。

       间接途径是指外植体先脱分化形成愈伤组织,再从愈伤组织的某些细胞,即重新“决定”为胚性细胞的细胞分化出体细胞胚胎。

       10、简述制造单胚人工种子的方法和工业化生产人工种子的步骤。

       人工种子由包裹在防护层中的体细胞组成,在制造单胚人工种子的时候,主要采用诸如藻酸钠一类的水凝胶作为体细胞胚的包被物质。藻酸钠(2%~3.2%,W/V)在室温下为液体,很适用于制造人工种子。当体细胞胚与藻酸钠混合以后,再滴人到硝酸钙或氯化钙溶液(100 mmol/L)中,30 min内表面即可完全络合,形成一层持久的种皮。此外,在种皮基质中还可加入一些对体细胞胚有益的物质,如能促进生长的微生物、营养物质、生长调节物质、杀虫剂以及用于旱地播种的亲水性化合物等作为人工胚乳。

       11、简要说明分离单细胞的方法。(1)由完整的植物器官分离单细胞

       分离单细胞的最佳材料是叶组织,因为叶片中的细胞近似于一个同质细胞群体,很适合用于特定和调控的大规模细胞培养。用机械法或酶解法可以从这种完整植物体器官(如叶组织)分离出单细胞。A机械法

       现在广泛用于分离叶肉细胞的方法是先把叶片轻轻研碎,然后再通过过滤和离心把细胞净化。和酶解法相比,用机械法分离细胞至少有两个明显的优点:①细胞不受酶的伤害;②不会发生质壁分离。B酶解法

       利用果胶酶(pectase)处理植物叶片,使细胞间的中胶层发生降解,分离出具有代谢活性的细胞。但是用于分离细胞的果胶酶不仅能降解中胶层,而且还能软化细胞壁。因此,用酶解法分离细胞时,必须对酶溶液给予渗透压保护,防止细胞的胀裂。酶解法分离细胞能得到较均匀一致的海绵组织细胞或栅栏组织细胞。

       (2)由培养组织中分离单细胞

       用于基础研究和应用研究的单细胞系统,在传统上常常是由离体培养的组织分离得到的,因为这个途径不但方便,而且广泛适用。只要把由经过表面消毒的器官上刚刚切取下来的一小块组织,置于含有适当比例的生长素和细胞分裂素的培养基上,即可建立起组织培养物,一般是愈伤组织。经过多次继代培养的愈伤组织可用来建立高度分散的细胞悬浮液,从而分离得到单细胞。

       12、什么是细胞悬浮培养?简述分批培养和连续培养的特点。

       悬浮培养(suspension culture)是指将游离的植物细胞按一定的细胞密度,悬浮在液体培养基中进行培养的方法。悬浮细胞培养的主要优点是:能大量提供比较均匀一致的细胞,也就是同步分离的细胞;细胞增殖的速度比愈伤组织快;适宜大规模培养,成为细胞工程中独特的产业。

       分批培养(batch culture)是指把细胞分散在一定容积的培养基中进行培养,当培养物增殖到一定量时,转接继代,建立起单细胞培养物。在培养过程中除了气体和挥发性代谢产物可以同外界环境交换外,一切都是密闭的。在分批培养中,由于细胞生长和代谢的方式以及培养基成分不断改变,没有一个稳定的生长期,相对于细胞的数目,代谢产物和酶的浓度也不能保持恒定,所以分批培养对于研究细胞的生长代谢并不是一种理想的培养方式。

       连续培养(continuous culture)是利用特制的培养容器进行大规模细胞培养的一种方式。连续培养的特点是:在连续培养中由于不断注入新鲜培养基,排掉旧的培养基,保证养分的充足供应,不会出现悬浮培养物发生营养亏缺的现象。连续培养可在培养期间内使细胞长久地保持在对数生长期中,细胞增殖速度快。连续培养适于大规模工厂化生产。

       13、离体授粉中影响结实的因子有哪些? 1外植体2培养基3培养条件4基因型

       14、离体胎座授粉方法有哪些方面的应用?(1)克服自交不亲合性(2)克服杂交不亲合性

       (3)通过孤雌生殖产生单倍体(4)培育抗逆性植物

       15、简述单倍体在遗传研究和植物育种中的意义和单倍体获得的途径。(1)单倍体在遗传研究和植物育种中的意义

       A在单倍体细胞中染色体组减半,表现型和基因型一致,一旦发生突变,无论是显性还是隐性,在当代就可表现出来。单倍体植株中由隐性基因控制的性状,虽经染色体加倍,但由于没有显性基因的掩盖而容易显现。因此单倍体是体细胞遗传研究和突变育种的理想材料。在诱导频率较高时,单倍体能在植株上较充分地显现重组的配子类型,可提供新的遗传资源和选择材料。B在品种间杂交育种程序中,通过F1代花药培养得到单倍体植株后,经染色体加倍立即成为纯合体,从杂交到获得不分离的杂种后代单株只需要2个世代,和常规育种方法相比,显著缩短了育种年限。获得单倍体植株的途径: ①雌核发育。

       ②胚珠雄核发育。

       ③通过远缘杂交消除一个亲本的基因组。④半受精。⑤化学处理。⑥高低温处理。⑦辐射效应。

       16、简述花粉分离与纯化的方法及花粉培养的方式。花粉分离与纯化的方法:(1)自然散落法

       (2)挤压法

       (3)机械游离法

       花粉培养方式:(1)平板培养(2)液体培养(3)双层培养

       (4)看护培养

       (5)微室培养

       (6)条件培养基培养

       17、影响雄核发育的因素有哪些?(1)基因型

       (2)植株生理状态和生长条件(3)花粉发育时期(4)预处理(5)培养基(6)药壁因子

       (7)培养条件:如温度、光照、板植密度等对雄核发育也有一定的影响。

       18、简述离体授粉的程序。

       离体授粉的一般程序是:①确定开花、花药开裂、授粉、花粉管进入胚珠和受精的时间;②去雄后将花蕾套袋隔离;③制备无菌子房或胚珠;④制备无菌花粉;⑤胚珠(或子房)的试管内授粉。

       19、试述影响胚培养的因素。

       1、培养基(无机盐,碳水化合物,氨基酸和维生素,植物生长调节剂,天然有机物,培养基的pH)

       2、培养条件(温度,光照)

       3、胚柄 20、简述“胚拯救“获得远缘杂种的方式。

       合子胚培养的最大用途是借以建立稀有的远缘杂种。在很多种间和属间杂交中,受精作用能正常完成,胚也能进行早期的发育,但由于胚乳发育不正常或杂种胚与胚乳之间生理上的不协调,造成杂种胚早期夭折,即发生所谓“受精后障碍”,最终不能形成有萌发力的种子。在这种情况下,通过“胚拯救” 即可克服这种受精后障碍,产生远缘杂种。

       “胚拯救”的方式有3种:一是杂种幼胚在人工培养基上培养,二是杂种幼胚的胚乳看护培养,三是杂种幼胚的愈伤组织培养:(1)杂种幼胚在人工培养基上培养

       在发生“受精后障碍”的情况下,若把杂种胚在开始夭折之前剥离出来,置于一种适当的人工培养基上培养,则杂种胚常常表现出正常生长的潜力,最终长成杂种植株。

       (2)杂种幼胚的胚乳看护培养

       如果胚的夭折发生在发育的极早期,由于人工培养基很难取代天然胚乳的作用,采用以上方法拯救杂种仍会遇到很大困难,在这种情况下,则可尝试胚乳看护培养法。

       (3)杂种幼胚的愈伤组织培养

       在以上两种方法皆难奏效的情况下,则可尝试杂种幼胚愈伤组织培养法,即先把杂种幼胚诱导成愈伤组织,经过或长或短的继代培养之后,再诱导杂种愈伤组织分化植株。这种方法是20世纪80年代发展起来的一种十分有效的方法。

       21、分生组织含毒量低的原因。

       分生组织含毒量低的原因可能是:①在植物体内,病毒可通过维管束组织系统长距离转移,转移速度较快,而分生组织中不存在维管束。病毒也可通过胞间连丝在细胞间移动,但速度很慢,难以追赶上活跃生长的茎尖。②在旺盛分裂的细胞中,代谢活性很高,使病毒无法进行复制。③在植物体内可能存在着病毒钝化系统,它在分生组织中比其他任何区域具有更高的活性。④在茎尖中存在高水平内源生长素,可抑制病毒的增殖。

       22、胚培养的应用。

       1.通过“胚拯救”获得远缘杂种 2.打破种子休眠,缩短育种周期 3.提高种子萌发率

       4.种子生活力的快速测定

第三篇:植物组培实验个人总结

       植物组培实验个人总结

       一、项目简介

       我们在实验中以植物为研究对象,通过对它们进行组织培养来观察植物的生长状况、激素对植物的促进作用、植物的褐化以及对它的改良等等。我们最初是对柳树、紫玉兰和栀子花这三个易于培养的植物进行实验,探索培养植物的方法以及如何能减少褐化。等到技术熟练后我们会开始进行一些与人们健康息息相关的植物的研究,去探索如何如何能够用最低的成本使得我们的植物成活以及对它们进一步的应用。

       二、本人在项目研究中承担的工作及发挥的作用

       本人在此次大学生创新性实验当中主要负责的是进行培养基的配制和植物的接种工作。培养基在配制过程中需要准确的数据,所以在配制培养基时需要较长的时间。我们现在进行的实验中我自己主要进行的是对母液和激素的称取以及植物的接种。我们现在正在锻炼自己对植物培养的技术性。并且,我们每个人需要对培养基配制和接种工作非常熟练,再去进行下一步更深入的工作。从我们称取药品开始到培养基灭菌结束共需要10小时左右时间,因此我们团队需要协商好每个人负责的项目。同时,由于我们团队的成员并非同一班级,我们需要把时间分配好,以免造成时间的盲区从而导致植物没人照看而出现问题。由于实验数据的准确性直接关系实验结果的测定,因此在本实验中占有重要的地位,测定过程中要求有很好的理论知识的基础和动手实际的能力,并且注重责任感。所以在实验的初期,查阅各种相关文献资料,了解实验注意事项,深刻理解实验原理,熟悉实验操作步骤,分析实验中可能遇到的问题和影响实验结果的因素。在实验初期制定实验规划,整理实验思路,过程中不断适当调整。积极配合其他成员完成实验。实验结束后,整理实验仪器,清洗实验器材。对实验的全过程认真负责,积极动手,遵守正确的实验要求。对此次实验的成功也发挥积极的作用。

       三、参加项目研究过程中的体验和收获(在能力培养和素质提高,特别是在创新思维和创新实践方面)

       通过这次参加创新实验,使我受益匪浅。从我们这学期刚开始参加这个创新实验到现在,我们学会了很多。从最基础的称量药品、制作棉塞,到比较复杂的制作培养基、植物接种等等。我们渐渐地在学习着。在以后我们可能会学到更多关于植物组织培养的操作技术。在培养基的配制过程中我们搅拌要注意不能让琼脂黏在玻璃杯底部变黑,要不停的搅拌。而且必须使之沸腾才能在移液后是培养基凝固以便于下一步的操作。记得在最初的时候我们制作MS培养基的母液也经常被感染,不能继续下一步。我们的培养基由于没有沸腾就装入培养皿而导致培养基全部重新做。我们最开始配制时往往要花费3到4小时才能完成一步的操作,而现在,我们仅需一个半小时就配制完成了。所以,在这个过程中,我学到了很多。并且,如果没有加入这个实验,我可能不会接触到植物的接种。在我们最近的实验中,我和黄小虎相继对植物进行了接种操作。它是让我真正认识到这是一个伟大的工程。从我们开始清洗植物一直到最后我们将植物接种完成移入恒温箱培养这一系列步骤中,我们由最初的手忙脚乱变成现在的游刃有余,我想这是我们团队一个很大的进步。我相信在以后的实验中我们团队会把实验技术练就的更加完善,去挑战一些更有价值的项目。

       其二,在实验研究方面,我最深的体会就是要需要勤于思考,主动动手动脑。创新实验和我们平时上课做的实验不同,只要按着老师讲的步骤做就行了。做的课题对于我们来说,大多是我们没有接触过,没有人告诉我们一步步该怎么做。我们需要自己去找文献查资料,去弄明白实验的理念。然后确定要研究的方向。按照这个方向一点点努力。所以每一步都需要独立思考。而且我们会遇到很多困难,这个时候除了寻找帮助,最重要的还是自己思考。同时,在创新方面,我们要确定创新的方向和目标。不能偏离主题,也不能随意猜测,而要有根据有目的地做出假想,正如我们在实验中调查活性炭对植物的褐化的影响一样。我们需要一步步实践去论证自己的猜测。其实,每一个伟大的成就都是这样“平凡”地一步步得出来的。另外,由于时间仓促和我们团队技术水平的限制,我们的实验还存在很多不足,主要表现在:由于实验条件,实验室条件以及实验者本身条件的限制,导致我们植物容易发霉、褐化等等。是我们不能进行下一步的实验。

       同时,在小组的协调和团队合作能力上,也得到了很大的提升。从实验开始到结尾,每个人都时刻在提出自己的意见与学习心得,工作的分担以及相互的交流让我收获了更多的知识。我们把每个人的任务分配正确往往能够节省更多的时间去进行下一步的操作。在这个项目的操作过程中,我们需要极大的耐心去进行实验,因为往往一个操作就需要我们进行2到3个小时。同时,他也让我感觉到了创新实验的乐趣。我们将一个植物组织进行培养让它成功的发芽,再生根并对它驯化后它就是一个正常的个体,可以和自然生长的植物一样在阳光下继续生长。我觉得这是一个很有成就感的事情。而且,这个实验也提高了我们的扩展思维能力,增强了我们之间的合作意识,在动手方面也有很大的进步,更重要的是结识了一些良师益友,对我们以后的实验顺利的进行也会有很多的帮助。

       因此,我希望在接下来的时间里,我们团队能够的进行更多有意义的课题实验,让我们的能力得到提升。同时在李景蕻老师的指导下我们能够获得更多关于植物的知识,去丰富我们接下来的大三生活。

第四篇:植物组培外植体消毒详解

       植物组培外植体消毒详解

       外植体的消毒

       植物组织培养用的外植体大部分取自田间,表面上附着大量的微生物,这是组织培养的一大障碍。因此在材料接种培养前必须要消毒处理,消毒一方面要求把材料表面上的各种微生物杀灭,同时又不能损伤或只轻微损伤组织材料而不影响其生长。因此,外植体的消毒处理是植物组织培养工作中的重要一环。

       (1)常用的消毒剂

       常用的消毒剂如下表所示。理想的消毒剂应具有消毒效果好,易被无菌水冲洗掉或能自行分解,对材料损伤小,对人体及其他生物无害,来源广泛,价格低廉。

       常用消毒剂的使用方法及效果

       ①酒精

       酒精是最常用的表面消毒剂,以70%~75%酒精杀菌效果最好,95%或无水酒精会使菌体表面蛋白质快速脱水凝固,形成一层干燥膜,阻止了酒精的继续渗入,杀菌效果大大降低。

       酒精具有较强的穿透力,使菌体蛋白质变性,杀菌效果好。同时它还具有较强的湿润作用,可排除材料上的空气,利于其他消毒剂的渗入。但酒精对植物材料的杀伤作用也很大,浸泡时间过长,植物材料的生长将会受到影响,甚至被酒精杀死,使用时应严格控制时间。但酒精不能彻底消毒,一般不单独使用,多与其他消毒剂配合使用。

       ②升汞

       又称氯化汞,Hg2 可以与带负电荷的蛋白质结合,使蛋白质变性,从而杀死菌体。升汞的消毒效果极佳,但易在植物材料上残留,消毒后需用无菌水反复多次冲洗。升汞对环境危害大,对人畜的毒性极强,使用后应做好回收工作。

       ③次氯酸钠

       次氯酸钠是一种较好的消毒剂,它可以释放出活性氯离子,从而杀死菌体。其消毒能力很强,不易残留,对环境无害。但次氯酸钠溶液碱性很强,对植物材料也有一定的破坏作用。

       ④漂白粉

       漂白粉的有效成分是次氯酸钙[Ca(ClO)2],消毒效果很好,对环境无害。它易吸潮散失有效氯而失效,故要密封保藏。

       ⑤过氧化氢

       也称双氧水,消毒效果好,易清除,又不会损伤外植体,常用于叶片的消毒。

       ⑥新洁尔灭

       这是一种广普表面活性消毒剂,对绝大多数植物外植体伤害很小,杀菌效果好。

       (2)消毒方法

       ①茎尖、茎段及叶片等的消毒

       消毒前先对植物组织进行修整,去掉不需要的部分,然后用自来水冲洗。对于一些表面不光滑或长有绒毛的材料,可用洗涤剂清洗,必要时用毛刷充分刷洗,硬质材料可用刀刮。消毒时在超净台上操作,先用70%酒精浸泡10~30s,以无菌水冲洗2~3次,然后按材料的老、嫩和枝条的坚实程度,分别采用2%次氯酸钠浸泡10~15min或用0.1%升汞浸5~10min。消毒时要不断搅动,使植物材料与消毒剂充分地接触。若材料有绒毛,最好在消毒液中加入几滴Tween-20,最后用无菌水冲洗3~5次。

       ②果实及种子的消毒

       先用自来水冲洗10~20min,再用酒精迅速漂洗一下。果实用2%次氯酸钠浸10min,后用无菌水冲洗2~3次。种子则先用10%次氯酸钠浸泡20~30min,难以消毒的可用0.1%升汞消毒5~10min。对于种皮太硬的种子,也可预先去掉种皮,再用4%次氯酸钠浸泡8~10min。

       ③花药的消毒

       用于组织培养的花药多未成熟,其外面有花萼、花瓣或颖片保护,处于无菌状态。消毒时将整个花蕾或幼穗用70%酒精浸泡数秒钟,然后用无菌水冲洗2~3次,再在漂白粉中浸泡10min,最后用无菌水冲洗2~3次。

       ④根及底下部器官的消毒

       由于这类材料生长于土壤中,表面带菌量大,消毒较为困难。可先用自来水冲洗,软毛刷刷洗,用刀切去损伤及污染严重部位,再用酒精漂洗后,置于0.1%升汞中浸5~10min或2%次氯酸钠中浸10~15min,最后用无菌水冲洗3次。

       在操作时要根据材料的大小、幼嫩、质地等差异做出判断后,再选择适宜的消毒剂种类、浓度和消毒时间,切不可生搬硬套。消毒的最佳效果应以最大限度地杀死材料上的微生物,而又对材料的损伤最小为好。

第五篇:十大信息源特点

       1、图书

       图书或称为书籍,包括专著、教科书、各种普及读物及各专业参考工具书等。图书经过编著者精心选择,反复斟酌后写成的,其内容系统、成熟、定型,信息经过筛选,可靠性强。图书可以帮助人们全面系统地了解某一特定领域中的历史和现状,将人们正确地领入自己所不熟悉的领域,还可以作为一种经常性的查考工具。不过传统印刷型图书编辑出版周期较长,更新速度慢,包含的内容一般只反映3-5年以前的研究水平。所以从信息检索的角度来看,图书一般不作为科研前查新的主要检索对象。

       2、连续出版物

       1986年,国际标准化组织给期刊下的定义是:“一种以印刷形式或其他形式逐次刊行的,通常有数字或年月顺序编号的,并打算无限期地连续出版下去的出版物”

       (ISO3297-1986)。广义的期刊则包括一切定期刊行或不定期刊行的连续性出版物。例如,杂志、报纸、报告、年鉴、丛书,以及学会的会议录,学报纪要等。

       期刊的特点是:内容专深、可靠、详尽、信息丰富,且数量大,品种多,出版周期短,能够及时反映有关领域的最新动态信息。因而期刊是人们获取一般基础理论研究知识和研究动态的重要信息源。

       3、科技报告

       科技报告是报道(记录)研究工作和开发调查工作的成果或进展情况的一种文献类型。科技报告基本上都是一次文献,许多最新的科研课题与尖端学科的资料往往首先反映在科技报告中。

       特点:内容专深,详尽、完整、可靠,出版及时,能够及时地反映研究进展信息。

       4、会议文献

       会议文献是指在学术会议上宣读或交流的论文和其他有关资料,分为会前文献和会后文献两种。会前文献包括会议预印本、会议论文摘要、会议议程和发言提要、会议近期通报或预告等。会后文献包括会议记录、会议专利、技术报告等。

       会议文献的特点是:出版形式不固定,它包含了大量的一次文献;同一会议的文献论题集中,内容新颖、丰富、专深、学术性强,能反映某学科或某专业的当前状况,往往代表着一个学科或某个专业的最新成果,反映着国内外科学技术的最新发展水平和趋势。所以,它是了解各国科技发展水平和动向的重要科技文献

       5、专利文献

       一切与专利制度有关的在专利申请和授权各阶段产生的文献统称为专利文献,包括发明说明书、专利说明书、专利局公报、专利文摘、专利分类与检索工具书,申请专利时提交的各种文件(如请求书、权利要求书、有关证书等),与专利有关的法律文件和诉讼资料等。狭义的专利文献一般指专利局公布出版的各种发明说明书,或者专利说明书及其所派生的各种二次文献。

       专利文献的特点是:内容具体、可靠、详尽、具有新颖性、创造性和实用性,能够反映科学技术的最新水平。然而由于同一个发明,往往在多个国家申请并拥有专利权,因而产生了大量的等同专利及其不同语种的专利文献。这种状况可以有效地促进专利信息的交流,提供给不同语种的用户利用专利信息的机会,但同时因为大量重复,增加了用户信息识别的难度和重复检索的负担。

       6、标准文献

       所谓标准,主要是对工农业产品和工程建设的质量、规格、参数及其检验方法等方面所作的技术规定,是从事生产和建设应当共同遵守的一种技术依据和规范。每一件技术标准都是独立的、完整的技术资料。

       标准文献的特点是:它的制订、审批有一定的程序,适用范围非常明确专一,编排格式叙述方法严谨划一,措词准确;技术上具有较充分的可靠性和现实性;有一定的有效时间,需要随着技术发展而不断修订,补充或废除,新陈代谢比较频繁。

       虽然标准一般不反映有关领域的最新消息,但它体现了具有一定法律约束力的技术规范。现在,我国已经与国际接轨,全面实施标准化生产,标准文献对于企业的技术、市场、产品具有极为重要的作用。许多企业开始有目的、有策略地应用各种标准文献,以便开拓国内外市场,获得更高的经济效益。

       7、政府出版物

       政府出版物是各国政府部门及其所属机构发表的文件,分为行政性和科技性两大类。行政性:政府报告、会议记录、法令、条约、决议、规章制度、调查统计资料等。科技性:科研报告、科普资料、科技政策、技术法规等。

       特点:政策性、综合性和指导性较强。政府出版物是了解国家的科学技术政策、经济发展政策,以及把握科技、经济和社会发展动向的很有针对性的可靠信息来源。

       8、学位论文

       学位论文是高等学校研究生本科生为获得某种学位而撰写的科学论文,有学士论文、硕士论文和博士论文等。学位论文质量参差不齐,所探讨的问题比较专深,有时在某些方面有独到价值,对研究工作有一定的参考价值。

       一般而言,学位论文并不是针对出版或发表而撰写的,流通范围较小,比较难以获得,因此尽管学位论文是一种能够反映较高研究水平的的信息来源,其在用户利用中却只占有较少的份额。

       9、产品样本

       包括各种产品目录、产品说明书和产品资料等,是对产品的性能、结构、原理、用途、使用方法、技术规范及产品规格等进行描述或说明的文献。

       其特点是:图文并茂,形象直观,出版及时,更新迅速,反遇的技术信息比较可靠,是了解产品及其生产技术工艺的重要信息来源。

       10、技术档案

       技术档案是指在生产建设中和科技部门的技术活动中形成的、涉及一定的工程对象的技术文件的总称。

       内容包括:任务书、协议书、技术经济指标、审批评文件,研究计划、方案、大纲和技术措施,有关的技术调查材料(原始记录、分析报告)设计计算、试验项目、方案、数据和报告,设计图纸、工艺卡片以及应入档的其他技术资料。它是生产建设和科研工作中积累经验,提高质量的重要依据,具有重要的信息价值。技术档案具有明显的保密性和内部控制使用的特点。